微生物分离技术,微生物分离技术原理

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于微生物分离技术问题,于是小编就整理了4个相关介绍生物分离技术的解答,让我们一起看看吧。

  1. 微生物细菌分离培养过程?
  2. 分离严格的厌氧微生物一般用什么方法?
  3. 固氮微生物的分离和鉴定?
  4. 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释浓度?

微生物细菌分离培养过程?

微生物细菌的分离培养过程主要包括以下几个步骤:

1. 原始样本微生态检测:在进行分离培养前,需要首先确认待分离的样本中是否有目标菌株。这时需要通过高通量测序方法来检测样本中微生物的种类和相对丰度。如果希望分离细菌,可以选择16S V3-V4或是16S V4-V5区域对原始样本进行测序。如果希望分离真菌,那么可以选择ITS序列进行测序。

微生物分离技术,微生物分离技术原理-第1张图片-吉林环保网
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2. 确认目标菌株:通过高通量检测原始样本中微生物的种类和相对丰度,确定后续要进行分离纯化的目标菌株。若样本中可以检测到目标菌株,则该样本可以进行后续的实验。若原始样本中没有目标菌株,则建议更换样本。

3. 培养条件筛选:根据目标菌株查找相关的培养信息,将不同培养基分别配置成固体平板,将样本进行梯度稀释。取部分菌液均匀涂布到不同的培养基表面上,按照指定的培养条件进行培养。

4. 菌落分离:在合适的培养条件下,待菌落生长到一定程度后,可以使用分区划线法或涂布分离法对菌落进行分离。分区划线法是将菌液在培养基表面划线,形成单菌落;涂布分离法是将菌液均匀涂布在培养基表面上,形成单菌落。

微生物分离技术,微生物分离技术原理-第2张图片-吉林环保网
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5. 纯化菌株:对分离得到的单菌落进行进一步纯化,可以通过多次传代培养和筛选,得到纯种的细菌菌株。

6. 保藏菌株:将纯化后的菌株进行保藏,以备后续研究使用。

通过以上步骤,可以完成微生物细菌的分离培养过程。

微生物分离技术,微生物分离技术原理-第3张图片-吉林环保网
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分离严格的厌氧微生物一般什么方法?

因为用稀释涂布平板***接触到空气 稀释摇管法 用固体培养基分离严格厌氧菌有特殊性,如果该微生物暴露于空气中不立即死亡,可以***用通常的方法制备平板,然后置放在封闭的容器中培养,容器中的氧气可***用化学物理或生物的方法清除。

对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物,纯培养的分离则可***用稀释摇管培养法进行,它是稀释倒平板法的一种变通形式。先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右,将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释,试管迅速摇动均匀,冷凝后,在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物,将培养基和空气隔开。培养后,菌落形成在琼脂柱的中间。进行单菌落的挑取和移植,需先用一只灭菌针将液体石蜡--石蜡盖取出,再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间,吹入无菌无氧气体,将琼脂柱吸出,置放在培养皿中,用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察和菌落的移植。

固氮微生物的分离和鉴定

选择培养基主要有:

1.以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌

2.不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物

3.培养基中加入青霉素分离得到酵母菌霉菌

4.培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金***葡萄球菌 鉴别培养基主要有: 伊红--美蓝培养基可鉴别大肠杆菌

为什么分离不同的微生物要***用不同的稀释浓度?

1、稀释的目的是为了达到每个微生物个体物理上的充分分离,以便在平板培养时能得到由单个微生物个体生长而来的菌落。

2、由于在原材料中不同微生物本身的密度(个/g)不同,密度大的需要更高的稀释度才能达到分离的目的。

3、各种微生物的生长速度不同,生长快的微生物需要更高的稀释度,以免菌落面积扩大太快造成菌落之间粘连。

到此,以上就是小编对于微生物分离技术的问题就介绍到这了,希望介绍关于微生物分离技术的4点解答对大家有用。

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