微生物平板计数,微生物平板计数方法

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于微生物平板计数问题,于是小编就整理了4个相关介绍生物平板计数的解答,让我们一起看看吧。

  1. 微生物的直接计数方法?
  2. 为什么微生物计数采用稀释倒平板法要选择30~300之间菌落的平板计数?求详细解答?
  3. 微生物计数原则?
  4. 微生物计数法?

微生物的直接计数方法

测定微生物数量的方法

(1)直接计数法:常用的是显微镜直接计数。

微生物平板计数,微生物平板计数方法-第1张图片-吉林环保网
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(2)间接计数法:常用的是稀释涂布平板计数法。

利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的( 0.1mm2),所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和,故又称为总菌计数法。

  

微生物平板计数,微生物平板计数方法-第2张图片-吉林环保网
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测定微生物计数的方法有很多,主要有以下几种:

1. 血细胞计数法

2. 将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数.

微生物平板计数,微生物平板计数方法-第3张图片-吉林环保网
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3. ①此法的缺点是不能区分死菌和活菌.

4. ②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数.

5. ③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化

6. 2.稀释涂布平板法

7. 原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落.培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.

8. ①这一方法常用来统计样品中活菌的数目

9. ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落.因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示.

什么微生物计数***用稀释倒平板法要选择30~300之间菌落的平板计数?求详细解答?

对于稀释涂布平板法计数菌落有如此的表述:为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。但是,若想当然地认为42、200、256三个数据均处于30~300范围之内,然后直接求平均值,再乘以稀释倍数,就会得出1.66×10^8的错误结果。这也是很多学生产生错误的原因。

事实上,教材中的相关表述只是在说明可计数的菌落数量的适宜范围。某一稀释度下的3个平板中菌落数并不能简单地直接求平均值,还应该关注稀释度的设置以及计数结果的允许差。

微生物计数原则?

1.筛选菌株的原理

选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。

微生物的选择培养:在选择培养基的配方中,把尿素作为培养基中的唯一氮源,只有能够利用尿素的微生物才能够生长;把纤维素作为培养基中的唯一碳源,只有能够利用纤维素的微生物才能够生长;在无氮源的培养基上,只有自生固氮菌才能够生长。

2.统计菌落数目的方法

(1)显微镜直接计数法(抽样检测法或血球板计数法)

原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。

方法:用计数板计算。

微生物计数法?

微生物计数的方法主要有两大类,一类是非培养的原位计数法,一类是培养后的计数法。

非培养的原位计数法,将适当稀释的菌悬液滴在细胞计数板上(2微升,需要体积准确),在显微镜下,通过显微镜观察计数板每个小格子里的细胞数量,统计出计数板上所有的细胞量。再根据稀释倍数和液滴的体积计算出原样品中1毫升中含有多少细菌细胞。

细菌细胞培养后计数方法有两种,一种是固体培养法(CFU),另一种是液体培养法(MPN)。

CFU法是梯度稀释培养法,将样品进行10倍的梯度稀释,通常环境样品稀释至10的-8次幂,细胞比较好的分散度。两所有的稀释样品取100微升均匀涂布在预制好的固体培养基平板上(2-3个平行),然后置于适当的温度(一般是25-30°)培养过夜,观察所有的平板菌落生长情况,分散均匀的基本就是一个菌落就是一个细胞形成的,计数菌落就是样品中的细胞数量,计数平板选择生长数量在100个菌落左右的平板比较准确。将平板菌落数×稀释倍数就得到原环境细胞数量。

MPN是细胞绝迹稀释法,将样品进行10倍的梯度稀释,稀释程度适当增加3-5个梯度,即一般稀释至10的-10至-12次幂。将每个稀释液分别取100微升转接入3个平行的液体培养基(3-5毫升)中,置于适当温度(一般25-30°),过夜培养。观察所有的稀释培养试管,记录绝迹生长最后三个稀释度的情况,查MPN统计表,将查表数值×稀释梯度,获得原样品细菌细胞数量。

到此,以上就是小编对于微生物平板计数的问题就介绍到这了,希望介绍关于微生物平板计数的4点解答对大家有用。

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