微生物的平板计数,微生物的平板计数实验报告

交换机 23 0

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于微生物平板计数问题,于是小编就整理了3个相关介绍生物的平板计数的解答,让我们一起看看吧。

  1. 微生物计数方法有哪些?
  2. 微生物计数原则?
  3. 工作人员手部微生物检测,涂抹法?

微生物计数方法有哪些?

微生物计数的方法主要有两大类,一类是非培养的原位计数法,一类是培养后的计数法。

非培养的原位计数法,将适当稀释的菌悬液滴在细胞计数板上(2微升,需要体积准确),在显微镜下,通过显微镜观察计数板每个小格子里的细胞数量,统计出计数板上所有的细胞量。再根据稀释倍数和液滴的体积计算出原样品中1毫升中含有多少细菌细胞。

微生物的平板计数,微生物的平板计数实验报告-第1张图片-吉林环保网
图片来源网络,侵删)

细菌细胞培养后计数方法有两种,一种是固体培养法(CFU),另一种是液体培养法(MPN)。

CFU法是梯度稀释培养法,将样品进行10倍的梯度稀释,通常环境样品稀释至10的-8次幂,细胞比较好的分散度。两所有的稀释样品取100微升均匀涂布在预制好的固体培养基平板上(2-3个平行),然后置于适当的温度(一般是25-30°)培养过夜,观察所有的平板菌落生长情况,分散均匀的基本就是一个菌落就是一个细胞形成的,计数菌落就是样品中的细胞数量,计数平板选择生长数量在100个菌落左右的平板比较准确。将平板菌落数×稀释倍数就得到原环境细胞数量。

MPN是细胞绝迹稀释法,将样品进行10倍的梯度稀释,稀释程度适当增加3-5个梯度,即一般稀释至10的-10至-12次幂。将每个稀释液分别取100微升转接入3个平行的液体培养基(3-5毫升)中,置于适当温度(一般25-30°),过夜培养。观察所有的稀释培养试管,记录绝迹生长最后三个稀释度的情况,查MPN统计表,将查表数值×稀释梯度,获得原样品细菌细胞数量。

微生物的平板计数,微生物的平板计数实验报告-第2张图片-吉林环保网
(图片来源网络,侵删)

最后说明,非培养的计数方法,是包含活细胞和死细胞的全部细胞的计数方法,而培养的计数方法,则是活细胞的计数方法。其中CPU法比MPN法准确,MPN法更具有现场操作的便捷性,各有优缺点,根据需要灵魂选择。

微生物计数原则?

1.筛选菌株原理

选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。

微生物的平板计数,微生物的平板计数实验报告-第3张图片-吉林环保网
(图片来源网络,侵删)

微生物的选择培养:在选择培养基的配方中,把尿素作为培养基中的唯一氮源,只有能够利用尿素的微生物才能够生长;把纤维素作为培养基中的唯一碳源,只有能够利用纤维素的微生物才能够生长;在无氮源的培养基上,只有自生固氮菌才能够生长。

2.统计菌落数目的方法

(1)显微镜直接计数法(抽样检测法或血球板计数法)

原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。

方法:用计数板计算。

工作人员手部微生物检测,涂抹法?

不能将棉球放到培养基里面培养,这样根本没办法计数。将棉签放入10ml灭菌生理盐水中,混匀,取1 ml到平板中,再到平板(45℃的培养基约15ml)。37℃培养48h,计数。

***如手很脏,细菌很多,则将棉签放入含10ml灭菌生理盐水的采样管后,取1ml到9ml无菌生理盐水中(相当于10倍稀释),再取1ml该稀释液到灭过菌的平板中,再倒入培养基。

到此,以上就是小编对于微生物的平板计数的问题就介绍到这了,希望介绍关于微生物的平板计数的3点解答对大家有用。

标签: 微生物 培养基 稀释