大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于土壤微生物生物量测定方法的问题，于是小编就整理了3个相关介绍土壤微生物生物量测定方法的解答，让我们一起看看吧。
如何计算土壤微生物的菌数？
计算土壤微生物数量，常见的有两种方法，一种是传统的培养法，即平板法，将一定质量的土壤制成悬浮液，稀释后涂到培养基上，培养18-24h，在显微镜下找菌落数目，乘以稀释倍数，粗略估算细菌数量。但这种方法只能得到可培养的微生物数目，仅占土壤总细菌的1%，另外99%的微生物是不可培养的，用这种方法得到的值只是参考数值；
第二种方法是高通量测序的方法，提取土壤总DNA，通过测定土壤中所有DNA的碱基序列，与细菌的碱基序列数据库比对，得到细菌的名称（操作分类单位，OTU），根据序列的条数大概估算这类微生物所占的比例。但这种方法无法区分死亡的细菌和活着的细菌，也有一定的局限性。
微生物计数方法有哪些？
微生物计数的方法主要有两大类，一类是非培养的原位计数法，一类是培养后的计数法。
非培养的原位计数法，将适当稀释的菌悬液滴在细胞计数板上(2微升，需要体积准确)，在显微镜下，通过显微镜观察计数板每个小格子里的细胞数量，统计出计数板上所有的细胞量。再根据稀释倍数和液滴的体积计算出原样品中1毫升中含有多少细菌细胞。
细菌细胞培养后计数方法有两种，一种是固体培养法(CFU)，另一种是液体培养法(MPN)。
CFU法是梯度稀释培养法，将样品进行10倍的梯度稀释，通常环境样品稀释至10的-8次幂，细胞比较好的分散度。两所有的稀释样品取100微升均匀涂布在预制好的固体培养基平板上(2-3个平行)，然后置于适当的温度(一般是25-30°)培养过夜，观察所有的平板菌落生长情况，分散均匀的基本就是一个菌落就是一个细胞形成的，计数菌落就是样品中的细胞数量，计数平板选择生长数量在100个菌落左右的平板比较准确。将平板菌落数×稀释倍数就得到原环境细胞数量。
MPN是细胞绝迹稀释法，将样品进行10倍的梯度稀释，稀释程度适当增加3-5个梯度，即一般稀释至10的-10至-12次幂。将每个稀释液分别取100微升转接入3个平行的液体培养基(3-5毫升)中，置于适当温度(一般25-30°)，过夜培养。观察所有的稀释培养试管，记录绝迹生长最后三个稀释度的情况，查MPN统计表，将查表数值×稀释梯度，获得原样品细菌细胞数量。
最后说明，非培养的计数方法，是包含活细胞和死细胞的全部细胞的计数方法，而培养的计数方法，则是活细胞的计数方法。其中CPU法比MPN法准确，MPN法更具有现场操作的便捷性，各有优缺点，根据需要灵魂选择。
土壤微生物标本采集最佳时间
土壤样品在作物收获后的9至10月晴朗的天气最适合***集收样。
一是在作物播种施肥前和收获后，二是果园在***摘后第一次施肥前，三是追肥前和作物生长关键时间。
土壤样品收集时间是秋收与秋播交界时间最佳。
一般在作物收获后或播种施肥前***集。
1、根据研究设计选择具有代表性的土壤，确定采样地。了解该地区的生物气候等情况，确定***样时间，避免雨季***样。
2、选择未经人为扰动的区域***样，耕地样品要在施肥前***集。
3、***样时要对土壤、生物、气候等环境因子进行调查记录，如地形、植被、土壤剖面结构、土壤水热状况、酸碱度、有机质含量等、
4、***样时所有工具、塑料袋或其他物品都要事先灭菌，或用***取的土壤擦拭。
5、***样程序如下：除去地面植被和枯枝落叶；铲除表面1cm左右的表土；多点***取重量相当的土壤进行混匀，去除石砾等杂质后再取一定量土壤装袋；取样深度依照研究设计而定，在同一剖面中分层取样时，应在挖好剖面后，先取下层土样，然后再取上层土样，以避免上下混杂。
到此，以上就是小编对于土壤微生物生物量测定方法的问题就介绍到这了，希望介绍关于土壤微生物生物量测定方法的3点解答对大家有用。
