微生物数量测定方法,微生物数量测定方法有哪几种

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于微生物数量测定方法问题,于是小编就整理了3个相关介绍生物数量测定方法的解答,让我们一起看看吧。

  1. 微生物计数方法有哪些?
  2. 菌落总数的计算方法?
  3. 国标法怎么测菌落总数?

微生物计数方法有哪些?

微生物计数的方法主要有两大类,一类是非培养的原位计数法,一类是培养后的计数法。

非培养的原位计数法,将适当稀释的菌悬液滴在细胞计数板上(2微升,需要体积准确),在显微镜下,通过显微镜观察计数板每个小格子里的细胞数量,统计出计数板上所有的细胞量。再根据稀释倍数和液滴的体积计算出原样品中1毫升中含有多少细菌细胞。

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细菌细胞培养后计数方法有两种,一种是固体培养法(CFU),另一种是液体培养法(MPN)。

CFU法是梯度稀释培养法,将样品进行10倍的梯度稀释,通常环境样品稀释至10的-8次幂,细胞比较好的分散度。两所有的稀释样品取100微升均匀涂布在预制好的固体培养基平板上(2-3个平行),然后置于适当的温度(一般是25-30°)培养过夜,观察所有的平板菌落生长情况,分散均匀的基本就是一个菌落就是一个细胞形成的,计数菌落就是样品中的细胞数量,计数平板选择生长数量在100个菌落左右的平板比较准确。将平板菌落数×稀释倍数就得到原环境细胞数量。

MPN是细胞绝迹稀释法,将样品进行10倍的梯度稀释,稀释程度适当增加3-5个梯度,即一般稀释至10的-10至-12次幂。将每个稀释液分别取100微升转接入3个平行的液体培养基(3-5毫升)中,置于适当温度(一般25-30°),过夜培养。观察所有的稀释培养试管,记录绝迹生长最后三个稀释度的情况,查MPN统计表,将查表数值×稀释梯度,获得原样品细菌细胞数量。

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最后说明,非培养的计数方法,是包含活细胞和死细胞的全部细胞的计数方法,而培养的计数方法,则是活细胞的计数方法。其中CPU法比MPN法准确,MPN法更具有现场操作的便捷性,各有优缺点,根据需要灵魂选择。

菌落总数的计算方法?

菌落总数计算方法

1、具体操作方法

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(1)培养到一定时间后,计算每个平板上的菌落数。可用肉眼观察,必要时可以使用放大镜检查。记下各平板的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数,计算出原始样品中每克(或每毫升)中的菌落数。

(2)到达规定培养时间后,应当立即计数。如果不能立即计数,应将平板放置于0-4℃的环境下,且不得超过24小时

2、菌落数选择

国标法怎么测菌落总数?

试验时应该不止做了10倍稀释这一组,一般会选择连续几个可能的稀释梯度进行试验。

  根据现行国标《GB 4789.2-2010食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》中对于菌落总数计算的规定:  如果只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,那么应计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每 g( mL)样品中菌落总数结果。  如果所有稀释度的平板菌落数均小于 30 CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

到此,以上就是小编对于微生物数量测定方法的问题就介绍到这了,希望介绍关于微生物数量测定方法的3点解答对大家有用。

标签: 菌落 稀释 细胞