大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于微生物限度检验记录的问题,于是小编就整理了3个相关介绍微生物限度检验记录的解答,让我们一起看看吧。
微生物限度检测,不溶于水的样品如何处理?可以取上清液做吗?
非水溶性供试品 方法1 取供试品5g(或5ml ),加至含溶化的(温度不超过45℃)5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中,用无菌玻棒搅拌成团后,慢慢加人45 ℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,边加边搅拌,使供试品充分乳化,作为1 : 20的供试液。
方法2 取供试品10g,加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯(制法见附录XII A无菌检查法中供试品的无菌检查项下)和无菌玻璃珠的适宜容器中.必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量,充分振摇,使供试品溶解。然后加入45 ℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml,振摇5~10分钟,萃取,静置使油水明显分层,取其水层作为l : 10的供试液。微生物限度检验为什么用0.45膜?
自然界中的大部分细菌尤其是致病,其尺寸都大于0.45微米,所以绝大部分细菌都能被0.45微米的膜截留,而且微孔滤膜并非筛孔,而是一个复杂的通道,标称的孔径是指最大的孔的等效孔径,所以即使是小于0.45微米的细菌也是绝大部分都能被截留,一般情况下截留粘质沙雷氏菌的能力测试HRV大于7,其***阴性的风险已经远远低于无菌检测其他过程(如取样恢复生长等等)可能导致的风险.所以各国药典对无菌检测的膜都选用0.45微米孔径.
纯化水微生物限度怎么检?
以下是微生物限度的检测步骤:
1、 装待检品水样的容器、取样的吸管、镊子等用品均要灭好菌,取水点打开让水流动一段时间。后快速取水样到容器中。
2、 把东西带入微生物限度实验室,以下步骤尽量在无菌条件下操作。
3、 先用缓冲液(PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液)对待检水样进行1:10 的稀释(10ml纯化水加90ml的缓冲液),后取10ml进行过滤,冲洗(用缓冲液50ml),冲洗量可按照验证方法的量,但不宜太多,主要是考虑避免滤膜上的微生物受损伤。
4、 视情况可做2~3个梯度的稀释浓度进行过滤,并每种培养基做双份测试,当时在深圳药检所学习时,做了三个梯度,每个梯度每种培养基做了两份,一个试样水就用掉了12张膜。
5、 纯化水微生物限度(微限)实验做三个梯度的理由,曾经有一个例子(药品):曾经遇到过的一种情况,用1:10供试液倒平皿,可能会一个菌都不长,而1:100及1:1000却长很多,这主要是因为样品药物有抑菌的作用,在1:10的条件下抑菌性还很高而是细菌被抑制生长,而1:100、1:1000时被稀释,抑菌性减小,有利于细菌的生长,这也是实验要首先做验证的原因,虽然纯化水出现这种可能性是微乎其微,这么做应该算是一种严谨的态度吧。
6、 过滤后,将集菌面朝上,贴于培养基上,靠培养基对膜的渗透供养菌生长,使其在膜上凸起生长,利于计数。反之则细菌向培养基渗入生长,会变模糊。
7、 营养琼脂培养基置于30-35摄氏度培养3天,玫瑰红钠在23-28摄氏度培养3-5天,每天记录细菌生长情况。
8、 到时间后计数菌落数量,换算成每ML多少个菌落报告。一般合格的标准是
到此,以上就是小编对于微生物限度检验记录的问题就介绍到这了,希望介绍关于微生物限度检验记录的3点解答对大家有用。