大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于微生物接种常用的方法的问题，于是小编就整理了2个相关介绍微生物接种常用的方法的解答，让我们一起看看吧。
微生物计数方法有哪些？
微生物计数的方法主要有两大类，一类是非培养的原位计数法，一类是培养后的计数法。
非培养的原位计数法，将适当稀释的菌悬液滴在细胞计数板上(2微升，需要体积准确)，在显微镜下，通过显微镜观察计数板每个小格子里的细胞数量，统计出计数板上所有的细胞量。再根据稀释倍数和液滴的体积计算出原样品中1毫升中含有多少细菌细胞。
细菌细胞培养后计数方法有两种，一种是固体培养法(CFU)，另一种是液体培养法(MPN)。
CFU法是梯度稀释培养法，将样品进行10倍的梯度稀释，通常环境样品稀释至10的-8次幂，细胞比较好的分散度。两所有的稀释样品取100微升均匀涂布在预制好的固体培养基平板上(2-3个平行)，然后置于适当的温度(一般是25-30°)培养过夜，观察所有的平板菌落生长情况，分散均匀的基本就是一个菌落就是一个细胞形成的，计数菌落就是样品中的细胞数量，计数平板选择生长数量在100个菌落左右的平板比较准确。将平板菌落数×稀释倍数就得到原环境细胞数量。
MPN是细胞绝迹稀释法，将样品进行10倍的梯度稀释，稀释程度适当增加3-5个梯度，即一般稀释至10的-10至-12次幂。将每个稀释液分别取100微升转接入3个平行的液体培养基(3-5毫升)中，置于适当温度(一般25-30°)，过夜培养。观察所有的稀释培养试管，记录绝迹生长最后三个稀释度的情况，查MPN统计表，将查表数值×稀释梯度，获得原样品细菌细胞数量。
最后说明，非培养的计数方法，是包含活细胞和死细胞的全部细胞的计数方法，而培养的计数方法，则是活细胞的计数方法。其中CPU法比MPN法准确，MPN法更具有现场操作的便捷性，各有优缺点，根据需要灵魂选择。
微生物分离方法？
最常用的两种方法：
1．平板划线分离法把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离。缺点：不能计数，一般用于从菌种的分离纯化。例如：筛选大肠杆菌菌种。
2．稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。优点：可以计数，可以观察菌落特征。缺点：吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延。一般用于平板培养基的回收率计数。 例如：测定纯净水中大肠杆菌的含量。
微生物分离法是获得微生物纯培养物的一种分离方法。通过这个方法可实现一种微生物的培养，或获得一个细胞的后代。其具体方法有：
1、稀释倒平皿法。将待分离的材料作一系列稀释，取不同稀释度适量涂布于固体培养基平板上或与已熔化的固体培养基一起倾注入平板内，经过培养即有一个微生物细胞繁殖来的单个菌落。
2、划线法。先将已熔化的固体培养基制成平板，待凝后，取分离材料在上面划线，可作平行划线、扇形划线或其他形状的连续划线，使菌样逐渐减少，最后得到单个孤立的菌落。扩展资料：微生物分离技术的应用措施：1、减少毒性氧物质的毒害作用：由于常规培养方法使用的高浓度营养基质不利于微生物生长，适当降低营养基质的浓度可以减弱这种不利影响。发现低浓度基质的培养基培养出的细菌在数量和种类上均多于高浓度基质的培养基，但营养浓度过低时会使培养出的微生物数量反而下降。2、维持微生物间的相互作用：在培养基中加入微生物相互作用的信号分子就可简单模拟微生物间的相互作用，满足微生物生长繁殖的要求。
3、供应新型的电子供体和受体：不同微生物的代谢过程不同，因此对反应的底物要求也不尽相同。供应微生物需要的特有底物有助于新陈代谢反应的进行及微生物的正常生长。大量的研究表明，将新颖的电子供体和受体应用到微生物培养中，能够发现未知的生理型微生物。
4、分散微生物细胞：自然界中很多微生物聚集生长，形成“絮体”和“颗粒”等，致使其内部的微生物不易被培养。对“絮体”和“颗粒”进行适度的超声处理，将细胞分散再进行培养，可以使更多的微生物接触培养基而得到培养。
5、延长培养时间：对“寡营养菌”的培养，可适当延长培养时间，使其能长至肉眼可见的尺度。当然培养时间不能无限增长，因为培养时间越长，对培养环境的无菌要求就越高 [4] 。
6、利用琼脂替代物：琼脂对某些微生物具有毒性作用，***用无害且凝结作用较好的替代物质作为培养基固化剂，可以增加微生物的可培养性。
到此，以上就是小编对于微生物接种常用的方法的问题就介绍到这了，希望介绍关于微生物接种常用的方法的2点解答对大家有用。
