dna微生物检测原理,dna微生物检测原理是什么

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于dna微生物检测原理的问题，于是小编就整理了2个相关介绍dna微生物检测原理的解答，让我们一起看看吧。

1. 微生物DNA提取的原理和方法是什么？
2. PCR技术在食品微生物检测中的应用？

微生物DNA提取的原理和方法是什么？

微生物DNA提取的原理和方法包括以下步骤：

1、 裂解细胞：通过特定的方法（如液氮研磨、蛋白酶分解、溶菌酶破壁等）从不同的材料（如动植物细胞、组织培养细胞、细菌）中初步获取DNA。

2、 抽提DNA：对得到的裂解混合物进行抽提DNA，此时的裂解物中DNA仍然与蛋白质结合着，其中还包含大量的RNA多糖等。

3、 提纯DNA：提纯DNA可以通过沉淀DNA和沉淀杂质的方式实现，或者通过物理吸附的方式来去除杂质提纯DNA。具体来说，提取植物细胞DNA的经典方法如CTAB法，CTAB是一种自带正电荷的物质，可与核酸结合形成复合物，这种复合物在低盐浓度中会沉淀并在高盐溶液中解离，从而逐步使DNA与杂质分离。提取动物细胞DNA的经典方法如SDS法，SDS是一种自带负电荷的物质，可与蛋白质结合使其变性并伸展解聚从而释放DNA，再通过高盐浓度沉淀蛋白质和多糖等杂质从而逐步实现提纯DNA。

4、 清洗和溶解：用缓冲液清洗DNA沉淀，以去除残留的杂质，然后将DNA沉淀溶解在适当的缓冲液中。

5、 保存：将DNA溶液保存于适当的温度下，如-20°或-80°。

以上步骤可能需要反复进行，直到得到纯化的DNA。

PCR技术在食品微生物检测中的应用？

PCR 技术检测微生物的基本原理是在被检测微生物核酸序列, 在PCR 体系下经高温变性、低温退火、适温延伸三步循环将单个核酸分子序列以2的指数进行大量***扩增的过程。

即在检测时, 被检测微生物双链DNA 序列在94℃变性解链成双链, 55℃特异性引物与单链DNA 结合, 72℃在引物的引导延伸***检测微生物DNA 序列。以上三步进行循环扩增得到大量的被检测微生物DNA 序列, 最后一般在凝胶电泳下检测目的DNA。理论上只要样品中有一个分子的微生物就可以在短时间内用PCR 技术检测到。食品中污染微生物种类很多, 即使是同一种食品中微生物种类也有很多, 用传统的方法检测食品中微生物要分离出所有的微生物很困难。特别是在检测食品中的弱势菌时, 可能很难用传统的方法检测出来, 特别是有些微生物很难培养, 而用PCR 技术检测这些微生物可以避免这些问题, 因此, 利用PCR 技术能够比较准确地检测食品中微生物。

到此，以上就是小编对于dna微生物检测原理的问题就介绍到这了，希望介绍关于dna微生物检测原理的2点解答对大家有用。

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