微生物计数怎么观察,微生物计数怎么观察的

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于微生物计数怎么观察问题,于是小编就整理了2个相关介绍生物计数怎么观察的解答,让我们一起看看吧。

  1. 微生物计数方法有哪些?
  2. 计数酵母菌的方法?

微生物计数方法有哪些?

微生物计数的方法主要有两大类,一类是非培养的原位计数法,一类是培养后的计数法。

非培养的原位计数法,将适当稀释的菌悬液滴在细胞计数板上(2微升,需要体积准确),在显微镜下,通过显微镜观察计数板每个小格子里的细胞数量,统计出计数板上所有的细胞量。再根据稀释倍数和液滴的体积计算出原样品中1毫升中含有多少细菌细胞。

微生物计数怎么观察,微生物计数怎么观察的-第1张图片-吉林环保网
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细菌细胞培养后计数方法有两种,一种是固体培养法(CFU),另一种是液体培养法(MPN)。

CFU法是梯度稀释培养法,将样品进行10倍的梯度稀释,通常环境样品稀释至10的-8次幂,细胞比较好的分散度。两所有的稀释样品取100微升均匀涂布在预制好的固体培养基平板上(2-3个平行),然后置于适当的温度(一般是25-30°)培养过夜,观察所有的平板菌落生长情况,分散均匀的基本就是一个菌落就是一个细胞形成的,计数菌落就是样品中的细胞数量,计数平板选择生长数量在100个菌落左右的平板比较准确。将平板菌落数×稀释倍数就得到原环境细胞数量。

MPN是细胞绝迹稀释法,将样品进行10倍的梯度稀释,稀释程度适当增加3-5个梯度,即一般稀释至10的-10至-12次幂。将每个稀释液分别取100微升转接入3个平行的液体培养基(3-5毫升)中,置于适当温度(一般25-30°),过夜培养。观察所有的稀释培养试管,记录绝迹生长最后三个稀释度的情况,查MPN统计表,将查表数值×稀释梯度,获得原样品细菌细胞数量。

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最后说明,非培养的计数方法,是包含活细胞和死细胞的全部细胞的计数方法,而培养的计数方法,则是活细胞的计数方法。其中CPU法比MPN法准确,MPN法更具有现场操作的便捷性,各有优缺点,根据需要灵魂选择。

计数酵母菌的方法?

有以下两种方法:

1、显微镜直接计数法,使用显微镜观察并直接数出酵母菌的总数量,此方法适用于酵母菌数量较少的情况。

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2、血球计数板计数法,也称分层抽样法,此方法适用于酵母菌总数较大时,可将含有酵母菌的溶液按一定比例进行稀释,置于显微镜下观察并计数,按稀释比例计算酵母菌总数量。

  第一:可以用显微镜观察,血球计数法   方法操作:   一、2mm×2mm方格的计数   2mm×2mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。

由于计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3。  计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。  1.16×25型的计数公式为:   酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×100×10000×稀释倍数   2.25×16型的计数公式为:   酵母细胞个数/1mL =80个小方格细胞总数/ 80 ×100×10000×稀释倍数   二、1mm×1mm方格的计数   1.16×25型的计数公式:   酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数   2.25×16型的计数公式:   酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数   第二:选择的稀释度,做平板计数   选择适宜的稀释度,吸取1mL加入平板,注入孟加拉红培养基,29摄氏度培养5-7天,计数。  酵母总数/mL=平板数X稀释倍数

到此,以上就是小编对于微生物计数怎么观察的问题就介绍到这了,希望介绍关于微生物计数怎么观察的2点解答对大家有用。

标签: 计数 稀释 细胞